镍Ni柱是大家在蛋白纯化中，应用较多的一种纯化柱料，属于固定化金属离子亲和色谱中的一种，1975年由Porath等发明，其间不断完善发展至今。
原理：过渡金属通过与电子供体配基上，能与金属离子相互作用的羧基或氨基的电负性元素（O，N），形成较稳定的金属螯合物。
在IMAC中，一个Ni2+有六个配位位点，被含有3，4或5个电子供体基团（配位位点）的螯合物固定在吸附剂上，而剩下未被占据的位点暴露于溶液中，能与组氨酸，半胱氨酸，和色氨酸的侧链或组氨酸标签的蛋白特异性结合。
镍Ni柱的使用与保养
镍Ni柱的洗脱通常采用竞争洗脱，先用低浓度的咪唑将杂蛋白和结合不牢的蛋白洗去，再用合适的浓度将目的蛋白洗脱。洗脱的先后顺序与蛋白的结合能力相关。
1、对于一般的预装柱，上样前，样品需要使用0.22μm/0.45μm滤膜进行过滤或者离心处理，以避免样品中有细胞碎片等固体物质，堵塞柱子。
2、如果细胞裂解后非常粘稠，需考虑是否因为DNA、RNA这类核酸物质过多，需要加入核酸酶去除，以降低样品粘稠度，提高上样速度及洗脱效果。
3、柱子使用过程中，不能超过填料的压力，以免填料被压塌。
4、每次使用后，可使用5-10倍柱体积的纯水或者结合缓冲溶液对柱子进行清洗。（如果出现载量严重下降或者压力增加，需考虑彻底清洗）
