未拆封的澳洲胎牛血清,一般情况下应存放于-10℃至-20℃,在产品规定的效期内均可使用,若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至合适大小的无菌离心管内,再放回冷冻。
将血清从冷冻冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融,或通过水浴锅促使其溶解。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。完全溶解后建议尽快使用,若长时间储存在2-8℃,胎牛血清中的各种(脂)蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可见的混浊。
总结:血清推荐在-10至-20℃条件储存,并避免反复冻融。
血清中絮状沉淀,它们是什么,怎么处理?澳洲胎牛血清在非冷冻状态下存放时,其中的多种蛋白或脂蛋白会形成肉眼可见的沉淀。如血纤蛋白(fibrin),在解冻过程中可能会发生聚集,形成肉眼可见的沉淀,当遇到此类情况,我们可以如下应对:
1、将冷冻保存的胎牛血清取出后,置4℃冰箱静止过夜;
2、待血清融化后,上下颠倒,轻轻混匀,继续4℃2-3小时;
3、轻轻吸取上层血清,分装,余底下50ml左右;
4、低速离心5分钟,去掉沉淀。
如何避免澳洲胎牛血清中产生沉淀?
1、解冻时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一;
2、分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡);
3、切勿由-20℃直接至37℃水浴锅解冻,较大的温差,易造成蛋白质凝结而发生沉淀;
4、切勿将胎牛血清置于37℃过长时间,否则可能使之浑浊,其中一些不稳定的组分也会因此受到影响,从而降低血清的品质;
5、血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤;
6、若必须做澳洲胎牛血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且保持摇晃均匀。温度过高、时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。