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亲和层析是一种根据生物分子之间的特异相互作用来分离蛋白的层析方法,如酶和底物、受体和配体、抗体和抗原。这种作用是特异性的也是可逆的,通过这种可逆的结合和分离来达到蛋白纯化的目的。生物分子与亲和层析介质上的配体通过共价键、范德华力、疏水力、静电力等作用发生生物学专一性结合形成复合物,共价链接在载体表面的功能团配体上。蛋白质亲和层析技术通过目标蛋白质与配体间通过特异性亲和力吸附而达到分离纯化的目的,具有生物专一性的特点,纯化效率高。亲和层析是应用生物高分子与配基可逆结合的原理,将...
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客户在收到依科赛胎牛血清FSP500后的需立即确认胎牛血清有无异常,如血清有没有出现融化情况、瓶口及瓶身有无出现碎裂、瓶口是否密封完整等情况。血清融化方法:建议产品使用梯度溶解法,将血清从-20℃冰箱取出后,于2-8℃解冻过夜,并在此过程中不时轻轻摇动使之溶解均匀。那么,细胞培养中出现的黑点是污染吗?更换依科赛胎牛血清FSP500后发现细胞镜下观察有黑点,需要肉眼观察细胞培养液有无混浊的情况出现,其次镜下观察细胞中的黑点是否有游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就...
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血清的质量对实验成败起着关键性作用,但血清使用不当也可能会导致血清质量下降,造成细胞培养效果不理想。AusgeneX澳洲胎牛血清很珍贵,大家在血清使用时怎样确定血清使用浓度?这个只能通过测试了。原则上血清添加量不要太多,通常分为5%、10%、20%几档。部分细胞原代提取时会使用20%血清,大部分细胞正常培养时会使用5%~10%的血清浓度。至于某一株细胞适应什么样的血清浓度,还需要根据细胞特性、实验目的做测试和调整。血清使用前需要离心吗?这个问题有以下两种可能:其一,因为血清融...
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eBlotL1快速湿转仪是用来转印蛋白的仪器,电泳转印为转移蛋白常用的方法,该技术有效、迅速,并且使得蛋白在凝胶中保持高分辨率。在凝胶中向印迹膜载体转印分离的蛋白质的过程,即是电泳转印法。因为此技术往膜上转印蛋白GX、快速和准确,并且能够使得蛋白在凝胶中保持高分辨率,在转移印迹技术中得到广泛的应用。eBlotL1快速湿转仪准备工作:1、准备对缓冲液进行转移,缓冲液的pH值.不要无故调整,如果仪器过热出错,那么可能选择了不适合的缓冲液。2、通电以后,凝胶在转移缓冲液中平衡,平衡...
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澳洲胎牛血清的正确存放与解冻是各位实验家尤为关注的一个问题,在保证质量的前提下,胎牛血清的正确存放与解冻的方法总结如下:1、澳洲胎牛血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃的冰箱使之全融。但必须注意的是,溶解过程中必须规则的摇晃均匀;2、长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下存储血清,避免反复冻融。3、建议血清硬保存在-20℃条件下。若存放于4℃时,请勿超过1个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器...
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胎牛血清作为细胞生长*的重要营养来源一直备受科研人员重视,那么澳洲胎牛血清在参与细胞培养实验都发挥着什么作用呢?胎牛血清,是胎牛血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。胎牛血清是细胞培养中用量很大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必需...
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His抗体能够特异性识别His标签,可以用于定性定量检测His融合蛋白的表达、细胞内定位等。为了让大家详细的了解该抗体,下面小编就介绍一下标签抗体进行蛋白纯化常见的问题及解决方法。His抗体蛋白纯化常见问题:一、蛋白不和介质结合可能原因:超声功率不合适(太大,蛋白碳化,太小,蛋白没*释放)解决方法:改变超声功率或者其它方法破碎细胞。样品或缓冲液不合适解决方法:确保缓冲液中螯合剂,还原剂,咪唑浓度不是很高。His标签暴露不*解决方法:在缓冲液中加变性剂(4-8M尿素,4-6M盐...
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随着创新药物研发的崛起,哺乳动物细胞大规模培养技术已经成为生物制药中*的一部分。目前,利用动物细胞培养技术生产的生物制品越来越多,进一步拓宽了细胞培养技术的应用范围,而胎牛血清作为动物细胞培养基中的关键组分之一,在动物细胞培养中占据重要地位。由于血清采集时间早,其胎球蛋白较多,并富含多种生长因子。同时,由于未接触外界环境,血清所含的内毒素、补体等细胞有害成分和抗体水平均是较低的。因此,血清从细胞培养的效果来看是不错的牛血清制品,在细胞培养的应用较为广泛。由于海关总署对供应企业...
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