Protein A亲和层析介质是由高度交联的均一聚丙烯酸酯微球构成,经过表面修饰技术的改造,在聚合物微球表面形成一层亲水性的涂层。亲水性涂层的表面进一步通过共价化学键引入带Ni2+的螯合配基,其中Ni2+选择性结合组氨酸标签蛋白。
在生物分子间存在很多特异性的相互作用,如我们熟悉的抗原-抗体、酶-底物或抑制剂、激素-受体等等,它们之间都能够专一而可逆的结合,这种结合力就称为亲和力。
亲和层析介质以高度交联的均一聚丙烯酸酯微球为基质,具有很高的机械稳定性且粒径高度均一,因此,层析介质具有抗压缩性能,不易出现堵塞。并且,他可耐10MPa的压力,支持高达2000cm/h的流速。
Protein A亲和层析介质是一种可控制孔径和粒径的均一多孔聚合物微球,其比表面积高达600m2/g,用其制备的亲和层析介质的功能团密度高,因此其动态载量高。层析介质的动态载量比Ni-NTA-Sepharose-FF填料的载量高1倍。
亲和层析介质粒径均一,相对传统的多糖类介质,粒径相对较少(30um或50um),且机械强度高,不易变形,因此分辨率明显高于多糖类介质。
Protein A亲和层析介质是分离纯化蛋白质、酶等生物大分子而有效的层析技术,分离过程简单、快速,具有很高的分辨率,在生物分离中有广泛的应用。同时,它也可以用于某些生物大分子结构和功能的研究。