镍Ni柱具有很高的稳定性和兼容性，兼容还原性试剂、变性剂、洗涤剂、以及其它添加物。适用于纯化可溶性蛋白和包涵体蛋白。为了让大家更多的了解Ni柱，这里给大家简单介绍一下如何根据实际需求自己填装Ni层析柱。
操作方法：
1、轻轻将镍Ni柱悬浮在水中，沉降后沉积物体积要达到35ml。自然沉降，不要用磁力搅拌器以免打碎微球。
2、将Ni树脂转移到砂芯漏斗中，用50ml纯水洗涤四次，除去储存液中的乙醇等物质，以纯水保存至50ml总体积。
3、用纯水清洗空色谱柱，然后关闭出口阀门，保留1cm高的液面。
4、通过玻璃三角漏斗将步骤2的树脂泥浆倒入色谱柱中，用纯水将柱子填满。
5、在柱子顶端安上接头并将之与泵连接，以一定的流速13ml/min（或400cm/h）。不要超过规定的树脂或柱子的使用压力。
6、保持流速，体积稳定后再流3倍柱体积。标记柱床高度。
7、关闭流速，关掉镍Ni柱的出口。断开顶端接头与泵，将顶端接头移至标记处，固定接头。
8、用1倍柱体积的0.1M硫酸镍以5ml/min流经柱子。
9、用10倍柱体积的水以10ml/min洗掉未结合的Ni离子。
10、如果柱子不马上使用，用20%乙醇以10ml/min的流速洗涤四倍柱体积后保存。
